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慢病毒包装三质粒系统购买-慢病毒包装的载体和普通质粒的区别

慢病毒包装三质粒系统购买-慢病毒包装的载体和普通质粒的区别

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  1. 最近准备包装慢病毒,购买慢病毒载体,谁可以推荐一下哪个过表达载体比较...
  2. 病毒包装的慢病毒
  3. 病毒包装-慢病毒

1、最近准备包装慢病毒,购买慢病毒载体,谁可以推荐一下哪个过表达载体比较...

慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。

包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒,以改变其嗜性。最常用的是疱疹性口腔炎病毒膜融合包膜G糖蛋白(VSV-G) 。

rev,tat。 rev 主要参与蛋白调节的表达水平, tat 参与蛋白转录的控制,与病毒的长末端重复序列(long terminal repeats, LTRS)结合后促进病毒的所有基因的转录。

-瞬时表达病毒载体包括: 乳多空病毒载体、腺病毒载体、疱疹病毒载体、痘病毒载体、RNA病毒载体。3-稳定表达病毒载体包括:牛乳头瘤病毒载体和EB病毒载体、逆转录病毒载体、腺联病毒载体(AAV)载体。

2、病毒包装的慢病毒

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。

病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒载体( Lentiviral vector )较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。

慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。

慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。

3、病毒包装-慢病毒

病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。

慢病毒包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。3)培养48hrs-72hrs左右,收集含有病毒的上清培养液。4)病毒的纯化和浓缩。

目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。

慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。

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