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不构建基因表达载体会有什么结果,基因表达载体的构建方法不完全相同

不构建基因表达载体会有什么结果,基因表达载体的构建方法不完全相同

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  1. 一定要构建表达载体行吗 不构建就一定不能导入受体细胞了?
  2. 如果只把一个不含载体的,单独一个或多个,外源基因,注入细胞核内,会发...
  3. 省略构建重组质粒有何后果?会影响目的基因的复制,转录还是翻译?_百度...
  4. 不使用质粒运载体目的基因会被分解么

1、一定要构建表达载体行吗 不构建就一定不能导入受体细胞了?

基因工程中,外源基因一定要加到运载体上才能导入受体细胞。如果不加到运载体上,一方面不能保证导入的基因表达,另一方面,极有可能被受体细胞水解掉。所以基因工程中都是将目的基因加到运载体上才导入受体细胞。

如果只导入一个目的基因,进入宿主细胞是不能进行复制表达的,也不能长期保留。所以必须与载体结合,进入宿主细胞后才能与宿主细胞的DNA结合,才能保留和表达。

需要通过载体而不能直接将目的基因导入受体细胞的原因是基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子等结构,而目的基因没有。

这基本是不可能的,因为只是一段基因片段,是无法进行复制扩增的。通过载体进行整合,是因为载体具有自主复制的功能,能够在受体细胞中生存。

不一定,看你用什么方法导入,比如说有农杆菌转化法就是通过细菌导入。微弹轰击法又称基因枪法就是直接导入。

2、如果只把一个不含载体的,单独一个或多个,外源基因,注入细胞核内,会发...

绝大多数会被核酸酶降解掉,有一些如病毒等序列会发生基因重组。

真核生物的遗传物质稳定性非常强,这就意味着它不会轻易接受外源基因,所以把一段外源基因直接注入细胞核内,发生重组的几率很小,可以忽略不计。基因工程中导入真核细胞并和真核细胞的遗传物质重组要经过特殊处理。

不,一定需要相关的酶和一些更高级的机制。平常的基因工程,如果仅仅把基因片段注入,等于注入了某种物物质而已,为什么会自动整合进去呢,需要人工去,比如限制性核酸内切酶,然后把目的基因导入才可以。

绝大多数最终会被分解。一般来说,外来dna进入细胞中可以通过细胞的转录系统还是转录,也就是转染的道理。但也有一小部分会重组到基因组中,比例非常低。

物理方法 1 DNA直接注射法: 是目的基因导入的最简单方法, 但注入量有限, 能够接触到的肿瘤细胞有限,故获得的肿瘤细胞转化率很低, 多通过肿瘤局部多点注射给药。

3、省略构建重组质粒有何后果?会影响目的基因的复制,转录还是翻译?_百度...

有复制起点,重组后可以复制让外源基因能复制。质粒载体:质粒载体 即,在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒dna序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。

质粒中标记基因的作用是有利于对目的基因是否导入进行检测。重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

质粒在基因工程中是作为载体送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。

转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。

4、不使用质粒运载体目的基因会被分解么

不会的,因为那个质粒只是作为一个载体的作用,质粒夹带着目的基因转入靶细胞以后,我们会认为的控制实验条件,让质粒上的目的基因整合到靶细胞细胞核基因上,质粒脱离目的基因后不久就会被宿主细胞分解掉。

当然可以,有各种试剂可以将目的基因导入细胞中(如Fugene, Lipofectamine)等等, 但是有些细胞系更容易成功(如HELA, CHO, HEK293), 而另一些则较难(巨噬细胞)。这个过程叫转染。

另外目的基因和运载体结合是为了让目的基因不被酶分解,因为运载体是独立的不会被分解,所以要结合。然后重组质粒能自主复制,不用和受体细胞的dna结合。就是说受体细胞的dna翻译和重组质粒的dna翻译是互不干涉的。

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