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细胞分离纯化失败案例(细胞分离法)

细胞分离纯化失败案例(细胞分离法)

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  1. 叶绿体分离纯化失败的原因
  2. 大学免疫实验中从小鼠脾中提取淋巴细胞实验失败的原因有哪些_百度知 ...
  3. 土壤分离纯化真菌失败的原因
  4. 为什么原核mRNA难分离纯化
  5. 要不同浓度的淀粉观察菠菜细胞质壁分离失败的原因有哪些

1、叶绿体分离纯化失败的原因

在分离过程中操作不当。例如细胞壁破裂、离心速度不够等。 实验条件不足也可能导致叶绿体不纯净。例如渗透压、离子强度等条件不合适。 分离的叶绿体本身就不够干净。

滤纸条上的滤液细线,不能触及层析液的原因:滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验就会失败。

因在低温下发生皂化反应。叶绿体色素溶液在低温下发生皂化反应,易乳化而出现白色絮状物,溶液浑浊,且不分层。叶绿素的荧光现象,叶绿素溶液在透射光下呈绿色,而在反射光下呈红色。

2、大学免疫实验中从小鼠脾中提取淋巴细胞实验失败的原因有哪些_百度知 ...

这是个简单实验,得到细胞量很大,能见到明显的淡红色,基本不会出现问题。观察不到细胞可能是液体加的多,离心弃上清即可。保证用的液体是缓冲液,Hanks液和PBS都可以。氯化钠会胀破细胞。别的我也想不到了。

这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的,有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多,而最常用的是有限稀释法。

因为在宿主的循环系统或脾脏中均未检测到供体脾细胞,或完整的供体MHCI分子。这也就表明,小鼠的巨噬细胞和单核细胞很可能获得了对抗原的特异性记忆。

小鼠脾脏单个核分离实验中细胞活力偏低的原因是年龄:小鼠脾脏单核细胞的活力会随着年龄的增长而变化。免疫状态:单核细胞的活力受到免疫状态的影响。

3、土壤分离纯化真菌失败的原因

首先可能是菌液中菌过多。其次划线次数多。最后真菌分离材料常污染有大量细菌。

原因如下:样品处理不当,导致菌种的存在被稀释和破坏。在进行枯草芽孢杆菌分离纯化的过程中出现了细菌、真菌等其他微生物的污染。培养条件不合适,影响其生长和分离纯化效果。

因污染而失败。食用菌组织分离往往因污染而失败,即使二人操作,也会因组织块在接种箱内移动的距离较大,难免失败,有的采用在培养基中加入适量抗菌素,但对真菌类杂菌无济于事。

最有可能的原因是菌液浓度过高。应加大稀释倍数。也有可能是无菌操作不规范,被杂菌污染。这个只要规范操作就可以了。

4、为什么原核mRNA难分离纯化

原核生物mRNA的纯化之所以比真核生物难其最主要的原因是原核生物mRNA的半寿期很短,很难得到。

一般mRNA分离纯化的原理就是根据mRNA 3’ 末端含有多poly(A)尾巴结构特性设计的。

原核生物翻译与转录偶联,边转录,边翻译,边降解。mRNA半寿期1-3分钟,不稳定,不易分离。为多顺反子,一个mRNA分子合成几种 蛋白质, 需要GTP,?GTP水解后EF-Tu从核蛋白体上掉下来。有三种终止因子。合成速度快。

一般mRNA分离纯化的原理就是根据mRNA 3’ 末端含有多poly(A)尾巴结构特性设计的。

5、要不同浓度的淀粉观察菠菜细胞质壁分离失败的原因有哪些

原因如下:原生质体和原生质层的区别,前者是基因工程中用纤维素酶和果胶酶处理后没有细胞壁的细胞。质壁分离的原因是细胞壁的伸缩性比原生质层差,细胞失水时细胞壁与原生质层分离。

首先要确定这个细胞是否还是完整的细胞,因为死细胞观察不到分离现象。比如将细胞放入纯水中,细胞破裂死亡,不会出现质壁分离现象。其次能确定这个细胞还活着的前提下,才能再去下一浓度测试。否则,一切测试无效。

胞质和细胞外的溶液存在浓度差,当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,细胞失水,原生质体缩小而出现质壁分离。放入清水中,由于外界溶液浓度小于细胞液浓度而吸水澎涨,出现质壁分离后的复原现象。

细胞大叶泡中原先的可能吸水膨胀 导致失水前不发生质壁分离。而在细胞壁的作用下。

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