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1. 怎么解离细胞组织?
2. 有谁知道细胞培养的详细步骤
3. 原代细胞的分离培养

1、怎么解离细胞组织?

漂洗 漂洗的目的是洗去根中多余的解离液。如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果，因为解离液中含有HCl溶液，而用来染色的染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜的镜头。

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法 物理裂解 和消化分离法。

解离的步骤：用刀片切下长约2到3毫米的根尖，放入盛有百分之十五盐酸和体积分数为百分之九十五的酒精溶液的混合液的培养皿中解离三到五分钟，使根尖组织的细胞相互分开，待根尖透明酥软即停止解离。

解离组织制片的常用方法有：质量分数15%的盐酸和体积分数95%的酒精，盐酸能杀死细胞，使其停止在各个分裂时期；还能溶解细胞之间的中胶层（破坏胞间连丝）。

2、有谁知道细胞培养的详细步骤

细胞培养是在实验室中通过人工方法培育和繁殖细胞的过程，细胞培养的一般步骤包括：细胞株选择和准备、培养基配制和消毒、细胞接种、培养条件控制、细胞培养和维护、细胞检测和鉴定。

复苏 把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。

消化分离　消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。 培养　细胞悬液用计数板进行细胞计数。

3、原代细胞的分离培养

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官，让它们在体外维持与生长。

漂洗 将含有钙、镁离子的培养基沿瓶壁缓缓加入，中止消化反应，采用漂洗法洗 2-3 次后，加入完全培养基。

静置培养：原代细胞在消化分离后，置于CO2培养箱的头24～48h （必要时72h）内，应处于绝对静置状态，切忌不时地取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁，更谈不上伸展和增殖，初学者尤应注意。

原代细胞的提取方法包括：一般悬浮细胞，如血液细胞，就分离后，直接培养。培养组织中的细胞，就需要消化过后，进行培养，也有用组织块培养的。

常用的适合做原代培养的材料包括： 鼠、人类的胚胎、脐带、脂肪、血液、骨髓、器官、组织和细胞等。原代培养是指从组织或细胞中直接分离出的细胞在适当的培养基中进行培养。

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