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细胞培养分离鉴定病毒步骤-细胞的分离和培养过程中必须遵循的基本原则

细胞培养分离鉴定病毒步骤-细胞的分离和培养过程中必须遵循的基本原则

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  1. 如何利用动物细胞培养来生产病毒疫苗?
  2. 腺病毒的鉴定方法
  3. 细胞培养步骤
  4. 简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。

1、如何利用动物细胞培养来生产病毒疫苗?

高效:CHO细胞可以大规模、快速地产生病毒S蛋白,提高疫苗的生产效率和生产产量。稳定性:CHO细胞经过多年的应用和实践,其生物学特性被充分了解,培养条件逐渐被优化,制备出来的疫苗质量得到了保证。

病毒的培养方法:(1)动物接种:病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖,并使动物产生特定的反应。优点:操作方面易行。缺点:受机体免疫力的影响,常需要用无菌动物。

疫苗研究:疫苗的研制离不开动物细胞培养技术,可以通过培养病毒、提取抗原等方法来制备疫苗。在新冠疫情中,各国科研人员利用动物细胞培养技术开展了新冠病毒疫苗的研究工作,并取得了重要进展。

进行动物细胞培养的常用条件是:无菌、无毒的环境;营养;适宜的温度和pH;气体环境。无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。

国外目前用生物反应器生产狂犬疫苗主要有两种工艺方法。

2、腺病毒的鉴定方法

大便查腺病毒抗体测定是一种检测人体大便样本中是否存在腺病毒抗体的检测方法。腺病毒是一类常见的病毒,可以引起呼吸道感染、肠道感染和眼部感染等疾病。

把家长累成人干。检验方法:咽喉采检送病毒培养,培养出病毒需要七天甚至更久,常常病人都痊愈回家了,报告才出来。幸好现在有快筛试剂,十分钟就知道结果,准确度也高。对付它的方法:无,只能多喝水、多休息。

流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒图1各种病毒在电子显微镜下的形态呼吸道病毒临床诊断现有的主要方法:抗原检测;抗体检测;病毒分离培养;分子生物学方法等。现将上述检测方法的优劣小结于表1。

为腺病毒所致。7两型是引起腺病毒肺炎的主要病原体,121型次之。

3、细胞培养步骤

细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。

细胞培养是在实验室中通过人工方法培育和繁殖细胞的过程,细胞培养的一般步骤包括:细胞株选择和准备、培养基配制和消毒、细胞接种、培养条件控制、细胞培养和维护、细胞检测和鉴定。

复苏,把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。(2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。

4、简述鸡新城疫病毒的分离鉴定步骤。

病程一般为5~7天,康复后出现歪颈、观星等神经症状。剖检可见全身黏膜及浆膜出血。

.准备蛋胚 接种 收获 1.病毒痘苗病毒(Vaccinia virus),鸡新城疫病毒(Newcastle distase virus)。

减少疫病的传播。新城疫病毒可以通过饮食、空气、接触等多种方法进行传播,为了减少疫病的传播性,一方面要注意及时清理鸡场的粪便及环境卫生,另一方面要注意进行鸡场的常规消毒工作。给鸡打疫苗。

生理盐水,0.5%鸡红细胞悬液,新城疫病毒液(尿囊液或冻干疫苗液),新城疫阳性血清,被检鸡血清。实验内容及操作方法(一)血球凝集(HA)试验 在96孔微量反应板上进行,自左至右各孔加50 uL生理盐水。

据了解,过去用常规方法检测新城疫病毒和禽流感病毒需要21天,采用现在的新方法仅需要4小时。这套检测方法是科研人员经过近一年的努力,在攻克禽流感病毒H5亚型快速检验检疫技术的基础上取得的又一重要成果。

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