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载体构建his标签-载体构建流程图

载体构建his标签-载体构建流程图

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  1. 载体上His标签加在C端还是N端,有什么区别

1、载体上His标签加在C端还是N端,有什么区别

his标签蛋白就是:六个组氨酸。一般存在于重组蛋白氮端或碳端,便于纯化该重组蛋白,组氨酸可以特异性的结合镍离子,带有组氨酸标签的重组蛋白可以被镍柱吸附,从而达到纯化的目的。

His标签是当前最流行的标签蛋白。His标签是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。

V5标签,是猿猴病毒5(SV5)副粘病毒P和V蛋白上存在的小表位(Pk)短肽,序列为RNA聚合酶α亚基的95-108位氨基酸残基GKPIPNPLLGLDST,可被融合到目标蛋白的N或C末端。

当然N端的tag带上没坏处,就是需要买EK酶(有点贵)。还需要在纯化后再过一次柱子。如果你不用后面的His标签,你需要在你的目的基因上加上终止密码子。

可以。根据查询优宁维生物官网显示,多聚his标签通常由6个组氨酸残基组成,但也可能在3到10个组氨酸残基之间,通常位于重组蛋白的C端或n端。

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