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1. ...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

1、...利用RNAi技术研究该基因的功能?RNAi载体怎么构建?

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法，被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段（添加了合适的酶切位点），使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

任何植物、线虫、果蝇、脊椎动物的基因都可以通过RNAi技术使其发生表达沉寂，所以RNAi技术已成为后基因组时代生命科学研究的有力工具 。在水稻中利用RNAi技术来验证定位的基因 。

rnai技术的基本程序主要为：确定干扰靶点、合成siRNA、转染siRNA到细胞中。确定干扰靶点：通过基因组学凳厅袜、转录组学等手段，确定需要干扰的靶基因或RNA。

RNAi技术在基因功能的研究上有其独特的优点 ： 简单易行，容易操作。对于动物来说，只要饲喂或注射即可，对植物可采用金属插入或农杆菌介导法。RNAi技术在转染细胞后48小时即可抑制基因的表达。

rnai技术的基本原理如下：RNA干涉（RNA interference，简称RNAi）是指一些小的双链RNA （double strand RNA，dsRNA）可以高效、 特异的阻断体内 特定基因表达，促使mRNA降解，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型。

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