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如何构建植物超标达载体(如何构建植物表达载体)

如何构建植物超标达载体(如何构建植物表达载体)

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  1. 植物表达载体构建的全过程?

1、植物表达载体构建的全过程?

基因表达载体的构建过程:目的基因的获取 (1)目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因。(2)获取方法:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。

载体构建目的 ①用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去。②利用他在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。

构建基因表达载体的步骤不论动植物都是一样的。首先需要用工具酶剪切运载体上的DNA分子,然后用DNA连接酶将目的基因与被被切割的DNA分子连接。在这里的运载体有一定的要求,倘若不清楚可以追问。

构建植物siRNA表达载体:设计编码产生小分子发卡RNA(hairpin:RNA,hpRNA)的DNA序列,编码hpRNA的DNA各链反向互补,中间加上7个碱基的间隙,将其连接到农杆菌双元载体质粒上,构建植物表达载体。

在一个典型的转基因植物生产过程中,这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组,以及筛选。基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。

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