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原核表达载体构建特点-原核表达载体和真核表达载体

原核表达载体构建特点-原核表达载体和真核表达载体

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  1. 根据真核基因在原核细胞中表达的特点,表达载体必须具备那些条件?_百度...

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作为一个基因表达载体,必须要满足以下条件:细菌的复制起始位点Ori;用来对转入质粒的细菌进行筛选的抗性基因比如:Kan Amp spec 等抗性筛选基因。

载体应具备的三个基本条件:①具有外源基因插入位点;②能携带外源DNA进入受体细胞并能自我复制;③具有选择标记以便于筛选。

完整的表达载体必须包括:复制子,在细菌中扩增时所必须。启动子,目的基因在细菌或细胞中转录所必须,转录了才能翻译,是谓“表达”。原核筛选标记,细菌增菌所必须。

要有合适的启动子、SD序列等。一般表达载体上都会有,选择合适的载体就行。注意读码框。 去掉内含子。一般用cDNA。 注意翻译后的加工。如果你的蛋白有糖基化等修饰,就很麻烦,要改造宿主或干脆真核表达。

没有启动子,基因就不能转录。由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子。 原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的合成极为重要。

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