大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于双荧光素霉载体构建的问题，于是小编就整理了1个相关介绍双荧光素霉载体构建的解答，让我们一起看看吧。

1. 双荧光素酶报告基因实验原理?

1、双荧光素酶报告基因实验原理?

利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特性，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。

双荧光素酶实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。

以下是双荧光素酶报告基因实验的基本原理步骤：构建负责表达荧光素酶的载体：在实验中，通常将感兴趣的基因调控区域与荧光素酶基因关联起来，构建成双荧光素酶报告基因的表达载体。

其核心原理是通过萤火虫和海肾荧光素酶的协同作用，其中萤火虫酶以其特有的黄绿色荧光表现出优异的实验研究性能，而海肾酶则作为内参，不依赖ATP，贡献出稳定的蓝色荧光。

miRNA主要通过作用于靶基因的3’ UTR起作用，因此可以将目的基因的3’ UTR区域构建到载体报告基因萤火虫荧光素酶的后面，通过与miRNA共转染后，检测报告基因表达的变化来反映miRNA对目的基因的抑制作用。

到此，以上就是小编对于双荧光素霉载体构建的问题就介绍到这了，希望介绍关于双荧光素霉载体构建的1点解答对大家有用。