本篇文章给大家谈谈载体构建序列太长，以及载体序列下载对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。 今天给各位分享载体构建序列太长的知识，其中也会对载体序列下载进行解释，如果能碰巧解决你现在面临的问题，别忘了关注本站，现在开始吧！

1. 急急急~构建重组质粒时,载体2.6kb,目的片段5.8kb,目的片段太大对实验...

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首先，连接的成功率低；其次，最重要的，连接上，转化后，能否成功增值表达，是个难题。找找有没有表达大片段的载体吧。

片段略长了些，增加了连接的难度，建议连接时控制一下载体和片断的摩尔比例1：3～1：10，载体的量尽量少些。

载体DNA分子大小应适合，以方便操作。对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。载体大小：大的质粒（大于15kb）不会很好转化而且DNA产量通常很低。在设计实验时要考虑到加入插入片段的最终载体大小，尽量用更小的载体。

可以直接转化化学感受态细胞Ecoli.DH5a。如果有TOP10，最好用这个，转化大质粒Top10要比DH5a更好。转化时记得要做对照试验。我做过类似的连接转化，试验还挺顺利，两种感受态都可以搞定。

kb的目的基因不长不短。合成过程还要看序列的GC含量。如果有局部GC较高的区域，建议楼主分段合成。我之前自己合过几条3kb左右的序列，因为GC含量较高，试了很多种方案，差不多做了1个月。

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