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分离肾小球系膜细胞,肾小球系膜解剖图

分离肾小球系膜细胞,肾小球系膜解剖图

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  1. 小鼠肾小球系膜细胞培养要注意些什么

1、小鼠肾小球系膜细胞培养要注意些什么

从大鼠体内取肾脏速度要快,严格无菌操作。 提取出来的肾小球经IV型胶原酶消化要摸索酶用量,消化时间,肾小球不易消化头。肾小球接种时,可在培养瓶表面用多聚赖氨酸,胶原,纤连蛋白等包被。

实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。

培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。把原有培养基吸掉。加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。

注意事项 (1)进入细胞间开始细胞培养时,必须严格按照下列步骤操作:①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题,不确定的溶液和耗材请勿使用,除非特殊情况,不要借用别人的溶液。

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