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分离小鼠原代细胞(分离小鼠原代成纤维细胞)

分离小鼠原代细胞(分离小鼠原代成纤维细胞)

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  1. 【实验视频】小鼠脑微血管内皮细胞原代培养

1、【实验视频】小鼠脑微血管内皮细胞原代培养

初次接种后,12到24小时后更换培养液,添加1 ng/ml的bFGF,后续每两天更换一次,为细胞提供最佳的生长环境。

在细胞培养中小鼠细胞原代培养加入的胎牛血清比例一般在5%~20%(最常见为10%)。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定最佳浓度。

小鼠心肌细胞的原代培养,一般选用生后1-10d的乳鼠心脏,尤以出生1-4d的较好,此时心肌细胞已分化充分,适于作各种研究,而出生4d以后的乳鼠心脏中分离出来的心肌细胞较慢发育成为有自律性搏动的心肌细胞。

与外周内皮细胞相同,大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子,调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性,内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。 准备纤维连接蛋白包被的培养瓶(2 μg /cm2,推荐用T-75的培养瓶)。

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。

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