大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于双酶切构建载体6的问题，于是小编就整理了1个相关介绍双酶切构建载体6的解答，让我们一起看看吧。

1. 如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌...

1、如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码蛋白的基因,并使之在大肠杆菌...

先用限制性内切酶切下基因，和其粘性末端相接，然后用病毒或其他物质导入。

转化：将连接好的质粒DNA导入到大肠杆菌细胞中，使其进入细菌细胞质。选择和筛选：将转化后的细菌细胞培养在含有适当抗生素的培养基上。质粒上通常携带有抗生素抗性基因，而大肠杆菌细胞则被设计成敏感于该抗生素。

方法2：自己构建时，主要将你从人源细胞系中抽提总mRNA，然后反转录。将反转录的总cDNA作为模板，通过PCR 特异的P53引物，克隆出这个基因 然后凝胶电泳分离纯化PCR产物；然后将该PCR产物插入到带有抗性的大肠杆菌质粒中。

大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRNA。细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。（3）没有翻译后的加工和修饰系统。（4）产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。

导入受体细胞：载体DNA分子上具有能被原核宿主细胞识别的复制起始位点，因此可以在原核细胞如大肠杆菌中复制，重组载体中的目的基因随同载体一起被扩增，最终获得大量同一的重组DNA分子。

到此，以上就是小编对于双酶切构建载体6的问题就介绍到这了，希望介绍关于双酶切构建载体6的1点解答对大家有用。